細胞功能學平臺

服務概述

　　吉妮歐生物細胞功能學平臺服務主要包括穩轉株構建、細胞增殖（CCK8、MTT、EDU、克隆形成）/細胞毒性檢測、細胞凋亡（Tunel、AnnexinV FITC）、細胞周期、細胞遷移與侵襲、JC-1、成脂誘導、成管實驗、雙熒光素酶報告基因系統、磁珠分選免疫細胞分型檢測、流式細胞鑒定、激光共聚焦檢測熒光表達、原代細胞分離等項目。
　　實驗項目重復性好，技術專業，服務體系完善，為客戶的科學研究保駕護航。

服務內容

1功能學實驗項目
　　1.1軟瓊脂克隆形成檢測
　　采用軟瓊脂克隆形成的方法，檢測腫瘤細胞的克隆形成能力，常用于判斷腫瘤細胞增殖情況或細胞治療產品中腫瘤細胞的殘留情況。
　　1.2 細胞增殖/細胞毒性
　　1、細胞增殖實驗包括了CCK8、MTT、EDU、CTG、克隆形成實驗，可對體外細胞進行活力檢測；
　　2、細胞毒性檢測包括CCK8、MTT、CTG檢測；
　　1.3 細胞遷移與侵襲
　　通過transwell實驗檢測細胞侵襲或遷移能力，通過woundhealing實驗檢測細胞遷移能力。
　　1.4 流式細胞術
　　1、細胞凋亡（AnnexinV FITC/PI）
　　2、細胞周期（PI法）
　　3、細胞表型鑒定
　　4、免疫細胞分型
　　5、平均熒光強度分析
　　6、ROS活性氧檢測
　　7、AM/PI活死率檢測
　　8、JC-1線粒體膜電位轉移檢測
　　1.5 磁珠分選與表達鑒定
　　提取PBMC進行磁珠分選檢測免疫細胞表達情況。
　　1.6 干細胞誘導
　　細胞成骨誘導與成脂誘導，檢測干細胞誘導分化能力。
　　1.7 細胞成管能力檢測
　　檢測不同條件干預下的細胞成管率。
　　1.8 雙熒光素酶報告基因
　　1.9 其他功能學實驗
　　特殊方案或其他沒有介紹的實驗，可咨詢我司相關技術人員。
2 細胞株構建
　　2.1 原代細胞分離與培養
　　原代細胞分離技術包括：大腦皮層與小腦神經元分離培養、脊椎背根神經節DRG分離與培養、腎小管上皮細胞分離與培養、間充質干細胞分離與培養、CD4+/CD8 +T細胞分離、小鼠肝癌細胞分離與培養等。
　　2.2 穩轉株構建
　　穩轉株是指通過基因編輯獲得穩定過表達或抑制特定基因的細胞株。采用慢病毒藥篩系統“慢病毒感染——藥物篩選法”or通過轉座子篩選系統進行穩轉細胞株的構建，包括構建過表達穩轉株、敲低穩轉株或疾病相關基因穩轉株。
　　2.3 耐藥株構建
　　通過大劑量藥物沖擊法、藥物濃度遞增法、藥物濃度遞增與大劑量藥物沖擊相結合法等方法學構建耐藥細胞株。
　　2.4 Cas9基因編輯細胞株構建
　　CRISPR/Cas9系統由一個單鏈向導RNA（small guide RNA, sgRNA）和一個具有核酸內切酶功能的Cas9 蛋白組成，其技術原理包括sgRNA引導的Cas9靶向DNA切割和DNA修復兩個基本過程。CRISPR/Cas9技術的優勢是能永久性地改變基因組DNA的序列，并且可以在不編碼的DNA區域進行編輯，可以多個位置同時進行編輯。
　　通過Cas9基因編輯技術，對目的基因進行敲除構建的細胞株可用于基因功能研究、疾病模型構建、基因治療等方面，具有廣闊的應用前景。
3 細胞實驗儀器檢測
　　3.1 酶標儀檢測OD值
　　通過不同的激發波長，對OD值進行檢測。
　　3.2 化學發光儀檢測自發光
　　可檢測ATP、熒光素酶等化學發光。靈敏度高，檢測速度快。
　　3.3 熒光顯微鏡檢測熒光表達
　　通過鏡下觀察細胞熒光表達情況。
　　3.4 活體成像儀檢測熒光穩轉株構建
　　通過活體成像儀記錄細胞熒光值，直觀快速。
　　3.5 LSM800激光共聚焦檢測熒光表達
　　通過LSM800進行激光共聚焦，高清晰、熒光定位精準。
　　3.6 BD流式細胞儀
　　通過BD流式細胞儀，4通道檢測細胞熒光。

服務流程

1、客戶提供資料
　　根據客戶方案、訴求或我司提供建議對方案進一步完善后，進行相關實驗的開展。
2、實驗開展周期

3、交付實驗數據
　　3.1、報告：實驗結束后，進行數據與圖片整理，涉及到分析統計的數據會在報告中列出，以報告形式提交。
　　3.2、圖片：原始數據整理打包；
　　3.3、實物交付：涉及到實物的實驗樣本，在實驗結束后，匯總打包；
4、接收反饋
　　實驗結束后，客戶在實驗流程、實驗操作、實驗結果上有疑問的地方，我司協助解答，必要情況下進行技術指導。

服務優勢

　　1、一站式服務
　　我司細胞庫有800株以上細胞株，資源種子齊全。提供產品全流程服務，省事省心；
　　2 、技術成熟
　　服務的科研院校、企業單位遍布全國，從事技術實驗的同事擁有10年以上經驗；
　　3、時間保證
　　對于每項實驗的完成周期，有完善的實驗管控體系和反饋體系（VR小程序進度記錄），可以做到反饋及時與高效完成。
　　4、提供專業技術指導
　　有專業的服務團隊，提供專業實驗技術建議與指導，為相關科學研究保駕護航；

代表案例

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